Χρώση May Grunwald – Giemsa

Επισκόπηση προηγούμενης Θ.Ενότητας Επισκόπηση επόμενης Θ.Ενότητας Πήγαινε κάτω

Χρώση May Grunwald – Giemsa

Δημοσίευση από medlsc Την / Το Δευ Ιουλ 19, 2010 3:40 pm

Χρώση May Grunwald – Giemsa



Η May Grunwald - Giemsa χρησιµοποιείται κυρίως για τα επιχρίσµατα αίµατος και µυελού των οστών.

Περιλαµβάνει ένα µείγµα χρωστικών, όπως:
Αυτή η χρώση χαρακτηρίζεται ως πανοπτική, επειδή βάφει όλα τα κυτταρικά συστατικά. Επειδή η τιµή του pH είναι πολύ σηµαντική για τις ιδιότητες χρώσης, οποιαδήποτε αλλαγή του pH θα οδηγήσει σε λανθασµένη αντίδραση χρώσης. Τα όρια βέλτιστου pH
είναι µεταξύ 6.5 και 6.8.

Υλικά:

επίχρισµα κυττάρων αίµατος, δοχεία και στατώ για χρώση, χρωστική May-Grünwald, χρωστική Giemsa, απεσταγµένο νερό

Μέθοδος

  • Βυθίζουµε την αντικειµενοφόρο µε το επίχρισµα αίµατος στο δοχείο µε τη χρωστική May-Grünwald.
  • Παραµονή 5 min σε θερµοκρασία δωµατίου.
  • Προετοιµασία του διαλύµατος Giemsa: Διαλύουµε 5 ml χρωστική Giemsa σε 50 ml απεσταγµένο νερό στο δοχείο χρώσης.
  • Ξεπλένουµε το επίχρισµα βυθίζοντας το και ανακινώντας το σε νερό, και το µεταφέρουµε στη συνέχεια στο δοχείο µε τη διαλυµένη χρωστική Giemsa.
  • Παραµονή 15 min σε θερµοκρασία δωµατίου.
  • Ξεπλένουµε καλά µε νερό (βυθίζοντας και ανακινώντας µέσα σε δοχείο νερού).
  • Στεγνώνουµε τις πλάκες στον αέρα.
  • Παρατηρούµε στο µικροσκόπιο µε καταδυτικό φακό (100 x) κάτω από
    σταγόνα ελαίου.
  • Εξέταση των επιχρισµάτων: Τα κόκκινα κύτταρα είναι ερυθροκύτταρα, τα κύτταρα µε ιώδη πυρήνα είναι λευκοκύτταρα. Εξετάζουµε 100 λευκοκύτταρα και τα κατατάσσουµε ανάλογα µε τον τύπο τους σε:

    • πολυµορφοπύρηνα ουδετερόφιλα (ταινιοειδή και τετµηµένα)
    • εωζινόφιλα
    • βασεόφιλα
    • λεµφοκύτταρα
    • πλασµατοκύτταρα
    • µονοκύτταρα

Αποτελέσματα

Στη χρώση αυτή βάφονται µπλε το RNA, το κυτταρόπλασµα και οι πυρηνίσκοι. Το DNA και τα πρωτογενή κοκκία βάφονται
κόκκινα και µωβ, καθώς και πορτοκαλί-κόκκινα η αιµογλοβίνη και τα εωζινοφιλικά κοκκία.

Σχετικό βίντεο της χρώσης από τη σελίδα REGNVM PROKARYOTAE.

Πηγή: Εργαστηριακή άσκηση Ανοσοβιολογίας, (Αικατερίνη Χλίχλια, Επίκουρος Καθηγήτρια Μοριακής Ανοσολογίας. Τμήμα Μοριακής Βιολογίας και Γενετικής του Δ.Π.Θ.)
Ενδιαφέρον έχει να διαβάσετε και το παρακάτω άρθρο:
Προσέγγιση στη διάγνωση από το επίχρισμα του περιφερικού αίματος (iatriki-gr.net)
Δείτε επίσης την διαδικάσία της χρώσης May Grunwald – Giemsa στα αγγγλικά
Giemsa (May-Grunwald) Staining Procedure

πηγή: http://www.bmlabs-mag.gr
avatar
medlsc
Site Admin
Site Admin

Αριθμός μηνυμάτων : 806
Points : 2407
Ημερομηνία εγγραφής : 18/07/2010

Επιστροφή στην κορυφή Πήγαινε κάτω

Επισκόπηση προηγούμενης Θ.Ενότητας Επισκόπηση επόμενης Θ.Ενότητας Επιστροφή στην κορυφή


 
Δικαιώματα σας στην κατηγορία αυτή
Δεν μπορείτε να απαντήσετε στα Θέματα αυτής της Δ.Συζήτησης